怎么检测艾滋.ppt

抽血检测，一般用三代酶联合免疫法 酶联免疫法，简称ELISA。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。 步骤：ELISA用血清来检测，首先血液要经过至少半个小时的凝集，然后取血清（这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因，其实是误会）。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品（这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内）。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲，如果第一次检测为阳性的话，无论是哪个实验室，必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测，第二次的方法必须与第一次的不同，如还是阳性，将送确认实验室确认。有的医院很不负责，将初筛阳性的报告发出后就不管了，这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS，第一次检测为阳性的话，一定要去确认实验室再做一次，勇敢的去面对，也许结果就不一样了。 基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。 具体方法有： （一）双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： （1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。 （2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 （3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。 （4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。 根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。 （二）双位点一步法 在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步（图15-5）。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。 在一步法测定中，应注意钩状效应（hookeffect），类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。 （三）间接法测抗体 间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下： （1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。 （2）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。 （3）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。 （4）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。 本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。 （四）竞争法 竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下： （1）将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。 （2）待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 （3）加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。 （五）捕获法测IgM抗体 血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下： （1）将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。 （2）加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。 （3）加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。 （4）加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。 （5）加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，是为阳性反应。 （六）应用亲和素和生物素的ELISA 亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素（strepavidin）。生物素（biotin）又称维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，生物素－羟基琥珀亚胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合，虽不属免疫反应，但特异性强，亲和力大，两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置，可以连接更多的生物素化的分子，形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来，就可大提高ELISA的敏感度。 亲和素－生物素系统在ELISA中的应用有多种形式，可用于间接包被，亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合，通过亲和素－生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。另外，在常规ELISA中的酶标抗体也可用生e79fa5e9819331333361323639物素化的抗体替代，然后连接亲和素－酶结合物，以放大反应信号。

根据你的问题简洁回答一下: 第一.你就去医院,挂个内科,然后抄和医生说,你要乙肝两对半.肝功能.AFP.梅毒.HIV等检查百来确定你身体健康.都是抽血的检查.大概300元,就是浪费点钱,了解自己身体健康. 如果你直接和医院说你检查HIV,吓死人的. 第二.或者你可以去市疾病防疫中心,那里有免费检查HIV的.第三.3周就可以检查了.第四.人体感染HIV后，一般度需要2周的时间才能产生抗体。“窗口期”是指人体感染HIV后到外周血液中能够检测出HIV抗体的这段时间，一般为2周～3个月问，少数人可到4个月或5个月，很少超过6个月。第五.你不能完全不能说答试纸不管用,可能准确低而已.好似早孕试纸也是一样啊.祝你健康快乐!

这个肯定是恐艾症了，换成是别人大部份也是这种情况的，百因为这个病发病之前跟正常人是一样的，除了用爱知高危风险可以判断出风险的程度外，其他的只能靠艾滋病检测的结果度才能排除，针对你的问题帮你做以知下回答：1、到医院挂皮肤科，或是直接去疾控中心检测；2、如果确诊为阳性才需要考虑治疗的事，一般CD4低于200单位道才开始治疗；3、你说的是窗口期，一般窗口期为两周至三个月，建议你3个月的时候最后做一次复查；4、试纸属于快速检专测，也是医院在用的，你这种提法本身就不对属，是采用何种检测方法由医院的医生进行选择。

你好，请根据病情的需求到医院进行检查，因个人的机体体质是不同的，相关的检查项目也是有差异的。到医院可以挂皮肤科或者传染性病专科。建议到正规的医院进行检查治疗。

祝你健康

一、 酶联免疫吸附试验（ELISA） 目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。 二、 颗粒凝集法（PA） PA为快速、简便的一种筛选方法。如属阳性，应经WB证实。PA不需任何特殊仪器，其结果用肉眼可判别。全过程仅需5分钟。缺点有假阳性，且价格昂贵。 三、快速试剂 (一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法) 雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外，肉眼观察，定性的免疫分析，检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用，本品检测阳性者7a64e78988e69d8331333236396530，需进行进一步筛查确认。 (二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂 InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法， 用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。该方法适用于初筛检测，凡由该试剂测定为阳性者，需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。 四、HIV-抗体确认实验 免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。国内常用的确认试验方法是WB。 (一_免疫印迹实验(westernblot，WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法，就HIV的病原学诊断而言，它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法，WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。 确认试验流程: 有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测，如果呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如果呈阳性反应，则报告HIV-1抗体阳性；如果不满足阳性标准，则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验，呈阴性反应，报告HIV-2抗体阴性；呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析， WB的敏感性一般不低于初筛实验，但它的特异性很高，这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化，能够检测针对不同抗原成分的抗体，因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出，初筛试验尽管选择质量较好的试剂，如第三代ELISA，仍会有假阳性出现，必须通过确认试验才能得出准确结果。 (二)免疫荧光实验(IFA) IFA法经济、简便、快速，曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜，需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响，结果不宜长期保存，IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

你好，百探讨概率没有任何意义，对于个体来说，染上就是百分百，染不上就是零的概率。大部份感染者的样本都是六周以内。如果我们愿意相信科学的话。一个是窗口期内不度要发生高危，六周检测问是阴，就可以完全排除了。而且对于满六周来说，任何艾滋病检测试剂都能检出来，绝对不会漏掉。但对于不满六周来说，就不敢保证，因为还处于窗答口期。别忘记采纳哦。

现在最常用的就是金标法和酶联法了。其中金标法是单人单分的，可以用来自检的，我们知道——ishizhi——有真品的。

现阶段中国共用三种检测方式在：第一种：百到医院检测，最好到当地三甲医院（这个是免费的））第二种：私密自检，通过在tian猫或j东用检测试纸自己进行度检测，如ai wei DPP等产品（几十到几百不等）第三种：专业机构送检，自己在家采集样本快递到知专业检测机构检测，再通过网络查询结果；如道：ai wei唾液采集器 1+1联检服务（包含唾检和尿检两种产品）

目前艾滋检测方法很多，步骤也不同。可以到医院或疾控免费检测，也可在家自测唾液收集器天猫检测项目的样品种类1. HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。2. HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。3. T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。4. HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑（DBS）。5. HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞（PBMC）及全血。当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。HIV 抗体检测HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。1. 初筛方法（1）酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到第四代，即同时检测血液中 HIV-1P24 抗原和 HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。（2）化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较 ELISA 有了进一步的提高，同时带来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。（3）快速检测（RT）方法此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但灵敏度和特异性远不如 ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定的市场影响力。主要包括以下几种方法：明胶颗粒凝集试验（PA）、免疫渗滤试验、免疫层析试验。e799bee5baa6313333613235632. 确认实验（1）免疫印迹试验（WB）WB 采用间接法检测样品中的抗 HIV-1/HIV-2 特异性抗体。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分离开来，经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。（2）条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）实验原理基本同 WB 法，不再赘述。HIV-1 抗原检测1. 筛查实验（1）酶联免疫吸附实验（ELISA 法）：即第四代抗原抗体联合检测试剂盒。抗体包被固相反应孔（管）的底部，待测样本中 P24 抗原与包被抗体形成抗原抗体复合物，再加入酶（HRP）标记的 HIV-1 抗体与抗原结合，加底物显色，在酶标仪上读取结果。因同时检测抗原抗体，灵敏度大大提高，有效缩短了 HIV 感染的检测窗口期，但因试剂成本较高，在普通筛查实验室推广有一定难度。（2）酶联荧光分析法（ELFA）：待测样品的 p24 抗原与包被在固相孔（管）内的 p24 抗体结合，并被生物素标记的 p24 抗体识别。临床实验室应用前景不明朗，需要荧光检测设备，成本较高。（3）电化学发光法（ECLIA）：待测样品的 p24 抗原与包被抗体的磁性微粒和发光剂标记的抗体在反应管中温育，形成磁性微珠包被抗体-抗原-发光剂标记抗体复合物。（4）抗原抗体快速检测法：同快速方法（RT）检测抗体，不同之处是用 HIV 抗体包被载体，检测灵敏度同样较差。2. 中和试验中和试验主要是 p24 抗原检测的补充试验，还可做 HIV-1RNA 的定性或定量检测，以排除筛查试验的假阳性。（1）酶联免疫吸附实验（ELISA 法）：待检样品先与中和剂（p24 抗原的抗体）共同孵育，如果样品中存在 p24 抗原，中和抗体将与之结合形成复合物，而不能与固相载体上的捕获抗体结合。（2）酶联荧光分析法（ELFA）：原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验（ELISA 法），中和率 ≥ 60 %，认为样品中的 p24 抗原是真阳性。（3）电化学发光法 (ECLIA)：原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验（ELISA 法），中和率大于 50%，认为样品中的 p24 抗原是真阳性。HIV 核酸检测目前国内 HIV 核酸检测试剂主要为 Taqman 实时荧光 PCR 检测试剂，可检测血浆、血清、组织器官或血液制品的 HIV-1RNA 和 DNA，DBS 可用于检测 RNA/DNA。全球目前正式用于临床诊断 HIV-1 急性期感染的核酸检测试剂比较少，主要是美国 FDA 批准的 Gen-Probe 公司生产的 Aptima HIV-1 RNA 核酸定性检测试剂和欧盟批准的 Abbott M2000 HIV-1 RNA/DNA 定性检测试剂。临床诊断相关的检测策略及结果报告HIV 检测阳性结果的检测过程一般经历两个阶段，初筛和复检程序。以 HIV 抗体检测为例，具体流程如下：试剂 1 进行初筛，结果无反应，报告「HIV 抗体阴性」；结果有反应，不能出具阳性报告，必须进入复检试验。对初筛有反应的样品，用原有试剂双份或双孔进行复检试验（或者两种试剂复检），如均无反应，报告「HIV 抗体阴性」；如均有反应或一个有反应一个无反应，进行补充试验（抗体确证试验和 HIV-1 核酸试验），报告 HIV 感染待确定。

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