09月22日, 2014 110次
专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具1.为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。2.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？提示：基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒（plasmid），即独立于细菌拟核DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA分子。是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。（1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。（2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。（3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。（4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。（5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。3.DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？提示：迄今为止，所发现的DNA连接酶都不具有连接单链DNA的能力，至于原因，现在还不清楚，也许将来会发现可以连接单链DNA的酶。4.根据你所掌握的知识，你能分析出限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？提示：原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。5.DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？不是一回事。基因工程中所用的连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为E•coli连接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4连接酶。这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键，那么，二者的差别主要表现在什么地方呢？（1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。（2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。此外，二者虽然都是由蛋白质构成的酶，但组成和性质各不相同。6.具备什么条件才能充当“分子运输车”？提示：能自我复制、有一个或多个切割位点、有标记基因位点及对受体细胞无害等。7.（1）限制酶所识别的序列有什么特点？限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。（2）限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？任何一种限制酶都只识别和切断特定的核苷酸序列，这是由限制酶的性质所决定的。（3）DNA连接酶连接的是什么部位？DNA连接酶是将一段DNA片段3′端的羟基与另一DNA片段5′端磷酸基团上的羟基连接起来形成酯键，而不是连接互补碱基之间的氢键。1.2 基因工程的基本操作程序1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？答：不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：（1） 生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；（2） 通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；（3） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；（4） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；（5） 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。2.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入单子叶植物，如小麦，从理论上说，你应该如何做？提示：农杆菌可分为根瘤农杆菌和发根农杆菌，在植物基因工程中以根瘤农杆菌的Ti质粒介导的遗传转化最多。根瘤农杆菌广泛存在于双子叶植物中，裸子植物对该菌也敏感。当这些植物被该菌侵染后会诱发肿瘤。根瘤农杆菌具有趋化性，即植物的受伤组织会产生一些糖类和酚类物质吸引根瘤农杆菌向受伤组织集中。研究证明，这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中，这也是单子叶植物不易被根瘤农杆菌侵染的原因。利用农杆菌侵染单子叶植物进行遗传转化时，是需要加上述酚类物质的，同时单子叶植物种类不同，农杆菌侵染进行遗传转化的效果也有很大差异。如果想将一个抗病毒基因转入小麦，也可以用农杆菌，但要注意两点：①要选择合适的农杆菌菌株，因为不是所有的农杆菌菌株都可以侵染单子叶植物；②要加趋化和诱导的物质，目的是使农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢（趋化性）和激活农杆菌的Vir区（诱导）的基因，使T-DNA转移并插入到染色体DNA上。3.利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？提示：有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网和高尔基复合体上加工完成的，内质网和高尔基复合体存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这两种细胞器，因此，在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。4.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？提示：基本操作如下：（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。（2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。（3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。（4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。5.你能推测出由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤吗？反转录酶既可以利用DNA又可以利用RNA作为模板合成与之互补的DNA链。像其他DNA聚合酶一样，反转录酶也以5′→3′方向合成DNA（图1-3）。 cDNA合成过程是：第一步，反转录酶以RNA为模板合成一条与RNA互补的DNA单链，形成RNA-DNA杂交分子。第二步，核酸酶H使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解，使之变成单链的DNA。第三步，以单链DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链，形成双链DNA分子。6.PCR的扩增过程是怎样的？PCR扩增是获取目的基因的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。PCR的扩增反应过程包括以下几个主要过程。第一步：将反应体系（包括双链模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸以及酶促反应所需的离子等）加热至90～95 ℃，使双链DNA模板两条链之间的氢键打开，变成单链DNA，作为互补链聚合反应的模板。第二步：将反应体系降温至55～60 ℃，使两种引物分别与模板DNA链3′端的互补序列互补配对，这个过程称为复性。第三步：将反应体系升温至70～75 ℃，在耐高温的DNA聚合酶催化作用下，将与模板互补的单个核苷酸加到引物所提供的3-OH上，使DNA链延伸，产生一条与模板链互补的DNA链。上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。7.什么是分子杂交技术的显示带？分子杂交技术是基因工程中使用频率很高的一项技术，主要用于检测和鉴定，可以分为核酸分子之间的杂交和蛋白质分子之间的杂交。常用的技术有：Southern杂交──DNA和DNA分子之间的杂交。目的基因是否整合到受体生物的染色体DNA中，这在真核生物中是目的基因可否稳定存在和遗传的关键。如何证明这一点，就需要通过Southern杂交技术。基本做法是：第一步，将受体生物DNA提取出来，经过适当的酶切后，走琼脂糖凝胶电泳，将不同大小的片段分开；第二步，将凝胶上的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上；第三步，用标记了放射性同位素（或生物素）的目的DNA片段作为探针与硝酸纤维素膜上的DNA进行杂交；第四步，将X光底片压在硝酸纤维素膜上，在暗处使底片感光；第五步，将X光底片冲洗，如果在底片上出现黑色条带，则表明受体植物染色体DNA上有目的基因。Northern杂交──DNA和RNA分子之间的杂交。它是检测目的基因是否转录出mRNA的方法，具体做法与Southern杂交相同，只是第一步从受体植物中提取的是mRNA而不是DNA，杂交带的显现也与Southern杂交相同。Western杂交──蛋白质分子（抗原—抗体）之间的杂交。它是检测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法。1.3 基因工程的应用1.表1-1 转基因生物与目的基因的关系转基因生物 目的基因 目的基因从何来抗虫棉 Bt毒蛋白基因 苏云金芽孢杆菌抗真菌立枯丝核菌的烟草 几丁质酶基因和抗毒素合成基因 抗盐碱和干旱作物 调节细胞渗透压的基因 耐寒的番茄 抗冻蛋白基因 鱼抗除草剂大豆 抗除草剂基因 增强甜味的水果 降低乳糖的奶牛 甜味基因 肠乳糖酶基因 生产胰岛素的工程菌 人胰岛素基因 人2.利用微生物生产药物的优越性何在?所谓利用微生物生产蛋白质类药物，是指将人们需要的某种蛋白质的编码基因，构建成表达载体后导入微生物，然后利用微生物发酵来生产蛋白质类药物。与传统的制药相比有以下优越性：（1）利用活细胞作为表达系统，表达效率高，无需大型装置和大面积厂房就可以生产出大量药品。（2）可以解决传统制药中原料来源的不足。例如，胰岛素是治疗糖尿病患者的药物，一名糖尿病患者每年需用的胰岛素需要从40头牛或50头猪的胰脏中才能提取到。1978年科学家用2 000 L大肠杆菌发酵液得到100 g胰岛素，相当于从1 000 kg猪胰脏中提取的量。又如，生长素是治疗侏儒症患者的药物，治疗一名侏儒症患者每年需要从80具尸体的脑下垂体中提取生长素。利用基因工程菌发酵生产就不需要从动物或人体上获取原料。（3）降低生产成本，减少生产人员和管理人员。1.4 蛋白质工程的崛起1.蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同？答：基因工程是遵循中心法则，从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能，基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质工程是按照以下思路进行的：确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列，可以创造自然界不存在的蛋白质。2.你知道酶工程吗？绝大多数酶都是蛋白质，酶工程与蛋白质工程有什么区别？提示：酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用，借助工程学的手段，应用于生产、生活、医疗诊断和环境保护等方面的一门科学技术。概括地说，酶工程是由酶制剂的生产和应用两方面组成的。酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业以及医药工业中。α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡萄糖异构酶这三个酶连续作用于淀粉，就可以代替蔗糖生产出高果糖浆；蛋白酶用于皮革脱毛胶以及洗涤剂工业；固定化酶还可以治疗先天性缺酶病或是器官缺损引起的某些功能的衰竭等。至于我们日常生活中所见到的加酶洗衣粉、嫩肉粉等，就更是酶工程最直接的体现了。通常所说的酶工程是用工程菌生产酶制剂，而没有经过由酶的功能来设计酶的分子结构，然后由酶的分子结构来确定相应基因的碱基序列等步骤。因此，酶工程的重点在于对已存酶的合理充分利用，而蛋白质工程的重点则在于对已存在的蛋白质分子的改造。当然，随着蛋白质工程的发展，其成果也会应用到酶工程中，使酶工程成为蛋白质工程的一部分。3.对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因操作来实现？毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下：（1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。（2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。4.动物乳腺生物反应器？1987年美国科学家戈登（Gordon）等人首次在小鼠的奶中生产出一种医用蛋白──tPA（组织型纤溶酶原激活物），展示了用动物乳腺生产高附加值产品的可能性。利用动物乳腺生产高价值产品的方式称为动物乳腺反应器。为什么要用动物乳腺作为反应器生产高价值的蛋白质产品呢？这是因为动物乳房是一种高度分化的专门化腺体，合成蛋白质的能力非常强，尤其是一些经过长期的遗传改良，专门产奶的乳用动物品种，蛋白质合成能力更是惊人。一头优质奶牛，一年可产奶10 000 kg。即便是一只奶山羊，一年也可产奶2 000 kg。动物乳腺生物反应器归纳起来有四大优点：①产量高，且易收获目标产品，可以随乳汁分泌而排出动物体外；②目标产品的质量好。动物乳腺组织不仅具有按遗传信息流向合成蛋白质的能力，而且具备一整套对蛋白进行修饰和加工的能力，如糖基化、羧化、磷酸化以及分子组装等，而微生物和植物系统都不具备这种全面的蛋白质后加工能力；③产品成本低；④从奶牛中提取产品，操作比较简单。 本回答由网友推荐
1基因工程2动物（动物细胞培养，核移植动物克隆，单克隆抗体）3植物（植物组织培养，动物体细胞杂交技术）4胚胎工程（体外受精，胚胎早期培养，胚胎移植，胚胎分割）其中一定注意胚胎分割要在桑葚胚或囊胚，还有内细胞团一定要平均分割。
呵呵呵，别想了，把书上内容看的滚瓜烂熟肯定考得好
详细点
这个就要把几本书合起来··这样看相同的知识点整理在一起··主要把书看的很熟应该不会有问题 本回答由网友推荐
你是要选修么？我学的是苏教版的，不知你学的是哪的。就按苏教版讲了。江苏高考，注重必修，因此，选修中的考点不多。选修3中的内容从整体上讲，“前重后轻”。重点是基因工程，植物细胞工程，动物细胞工程。这三点又有共同点，可以分：1、过程2、工具3、应用来分条记忆同时，还要注意植物与动物的异同。以上是重点，其余的东西看看就好。
生物会考必修3随静细胞外液(即内环境)：血浆（多蛋白质）、组织液和淋巴内环境稳态与细胞代谢有关，并在神经调节和体液调节/免疫调节的共同作用下，各系统（内分泌系统、免疫系统）分工合作、协调统一而实现的影响稳态的因素：温度、酸碱度、渗透压Eg：人长时间运动后，产生口渴感觉的原因：血浆渗透压升高神经—体液—免疫调节网络是机体维持稳态的主要调节机制机体调节：神经调节、体液调节神经调节基本方式：反射。它的结构基础：反射弧，包括：感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器神经系统的基本结构和功能单位：神经中枢各种激素调节通常属于体液调节的控制兴奋以神经冲动的形式在一条神经纤维上传导，双向性；在两个神经元通过突触（包括：突触前膜、突触间隙、突触后膜）传导，单向性（神经纤维未受刺激，电位外正内负；有受刺激产生兴奋，电位外负内正（后一种易形成局部电流）（胰岛分泌胰高血糖素和胰岛素）Eg：正常情况下，人体进食后（增加葡糖糖）血液内胰高血糖素减少和胰岛素增加（B细胞分泌）在反射活动中能够起分析综合作用的部分：神经中枢下丘脑的作用1） 对体温具有调节作用2） 对垂体激素的释放具有调节作用3） 对人体内水的平衡起调节作用使人产生渴望的感受器和神经中枢分别位于下丘脑和大脑皮层控制人体排尿反射的最高级中枢位于大脑皮层下丘脑分泌促甲状腺释放激素（作用部位：垂体）垂体分泌促甲状腺激素（作用部位：甲状腺）甲状腺分泌甲状腺激素以上3种，统称反馈调节免疫系统（具有防卫、监控、清除功能）免疫细胞：吞噬细胞、淋巴细胞（T细胞（胸腺）和B细胞（骨髓））第一道人体防线（非特异性免疫）：皮肤、黏膜第二道人体防线（非特异性免疫）：杀菌物质、吞噬细胞第三道人体防线（特异性免疫）：体液免疫、细胞免疫（淋巴细胞——B细胞：浆细胞产生抗体，体液免疫；淋巴细胞——效应T细胞直接接触靶细胞：细胞免疫）Eg：体内的天花抗体能抵御天花病毒语言功能是人脑特有的高级功能W区故障：不能写字；S区故障：不能讲话；V区故障：不能看懂字；H区故障：不能听懂话生长素向光性实验发现：植物生长素产生部位：胚芽鞘尖端感受光刺激的部位：胚芽鞘尖端向光弯曲的部位：尖端下面的一段植物不生长的情况：去掉胚芽鞘尖端植物生长不弯曲的情况：用纸遮住胚芽鞘尖端（不能感光）植物弯曲生长的情况：去掉胚芽鞘尖端，但加琼脂块（弯曲方向与琼脂块方向相反）一般来说，低浓度促进生长，高浓度抑制生长背光面的生长素比向光面多对生长素的敏感程度：根 >芽 >茎生长素的主要合成部分：嫩芽、叶、发育中的种子Eg：农民适时摘除棉花的顶芽，解除顶端优势，促进侧芽发育，多结果食物链和食物网被生产者固定的太阳能生产者——绿色植物（第一营养级）——自养生物食草动物——初级消费者（第二营养级）肉食性动物——次级消费者（第三营养级）肉食性动物——三级消费者（第四营养级）肉食性动物——四级消费者（第五营养级）能量传递中，能量损失最少的食物链（以10%计算）；能量损失最多的食物链（以20%计算）两种生物之间关系：一般填：竞争和捕食(看箭头方向)图中箭号除表示两种生物之间捕食和被捕食的关系外，还表示物质和能量在生态系统中的流动方向CO2的产生和转换：光合作用、呼吸作用知识点（各章分散→罗列）抗原：病毒（蛇毒）、接种后疫苗Eg：人体的免疫功能，可清除自身的损伤细胞，其中损伤细胞称为抗原抗体：针对某种抗原的蛋白质种群密度是种群最基本的数量特征种群：统一地域中同种生物个体的总称在一个发育良好的森林里，从树冠到地面可划分为乔木层、灌木层、草木层和地被层，林下透光度不同的地点，植物种类也有区别。表明了群落有一定的垂直结构和水平结构生物群落中最重要的两种成分：生产者、分解者种间关系：竞争、捕食、互利共生和寄生Eg：稻田中水稻和水稻之间争夺水肥、阳光等而形成的关系：种内斗争稻田中水稻和杂草之间争夺水肥、阳光等而形成的关系：种间竞争群落演替初生演替1） 裸岩上进行的演替2） 沙丘上进行的演替3） 冰川泥上进行的演替4） 火山岩上进行的演替次生演替1） 火灾过后的草原上进行的演替2） 过量砍伐的森林上进行的演替3） 弃耕的农田上进行的演替计算基因频率Eg：设给某地区人群调查：AA占95%，Aa占，aa占2%，求该地区人群A的基因频率？AA+1/2（Aa）=95%+1/2 ^ 3%=96.5%（就是把A的情况全算下，AA+1/2（Aa）为规律哦）物质循环具有1）全球性2）反复性生态系统会自动调节（抵抗力稳定性上升，则恢复力稳定性下降）生态系统的信息传递1. 物理信息：包括声（红/紫外线、鸟类鸣叫）、光（萤火虫发光、毒蜂身上斑斓的花纹）、颜色、热（哺乳动物的体温） 2. 化学信息：酶、性信息素3. 行为信息：蜜蜂独特的“舞蹈动作”对保护和改善环境最有效的方法是：参加宣传环保公益事业
选修3、现代生物科技专题专题1、基因工程什么是基因工程？1.1DNA重组技术的基本工具一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）一来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。二功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。三结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，黏性末端和平末端。二、“分子缝合针”——DNA连接酶一功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。连接部位：磷酸二酯键，不是氢键。二两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：⒈相同点：都缝合磷酸二酯键。⒉区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。三与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。三、“分子运输车”——载体(与细胞膜上的载体有什么区别？)一作为载体的必要条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；对受体细胞无害、易分离。二最常用的载体是 质粒：是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。三其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。1.2基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取(什么是目的基因？)一获取方法：原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。二从基因文库中获取目的基因什么是基因文库？什么是基因组文库？什么是部分基因文库？三者间是什么关系？怎样从基因文库中获取目的基因？三利用PCR技术扩增目的基因⒈什么是PCR技术？⒉原理：DNA双链复制。⒊PCR技术需哪些必要条件？PCR的结果是什么？⒋过程：变性→退火→延伸→多次重复。四直接人工合成。二、基因表达载体的构建（该过程实际上是不同来源的基因重组的过程，是基因工程的核心）一构建基因表达载体的目的是什么？怎样构建？二一个基因表达载体的组成：复制原点＋启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因什么是启动子、终止子？它们分别在基因表达载体上的什么位置？各有什么作用？标记基因有什么作用？三、将目的基因导入受体细胞一转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。二常用的转化方法⒈将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。导入到了植物细胞的什么位置？⒉将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。⒊将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的优点有哪些？最常用的原核细胞是什么？转化方法是什么？三重组DNA导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。四、目的基因的检测和表达一首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因。方法：DNA分子杂交技术。该方法的原理是什么？二其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA。方法：用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。三最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。四有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。1.3基因工程的应用一、植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。二、动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物、作器官移植的供体。三、基因工程药物：细胞因子、抗体、疫苗、激素等。四、基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，多而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。1.4蛋白质工程的崛起一、天然蛋白质为什么不能完全适应生产和使用需要？实现蛋白质工程的基本途径是什么？二、蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）专题2 、细胞工程什么是细胞工程？根据操作对象不同，可分为哪几种？2.1.1植物细胞工程的基本技术一、理论基础（原理）：细胞全能性。一什么是细胞的全能性？在生物生长发育过程中，细胞为什么不会表现出全能性？二全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞。植物组织培养技术一过程什么是植物组织培养？什么叫脱分化？脱分化的实质是什么？(恢复细胞全能性的过程)脱分化的结果是什么？什么叫再分化？什么是愈伤组织，有什么特点？二地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。三、植物体细胞杂交技术一过程植物体细胞融合遇到的第一个障碍是什么？温和的去壁方法是什么？把原生质体放在一起会自然融合吗？二什么是植物体细胞杂交？三意义：克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍。四传统的有性杂交与本节的体细胞杂交有何区别？(生殖方式；物种)2.1.2植物细胞工程的实际应用一、植物繁殖的新途径一微型繁殖。什么叫植物的微型繁殖技术？微型繁殖技术有什么优点？(繁殖速度快；保持母本性状；不受自然生长季节的限制)二作物脱毒。无性繁殖作物染毒后有什么症状？什么是作物脱毒？三人工种子。天然种子有哪些缺陷？什么是人工种子？有什么优点？二、作物新品种的培育一单倍体育种。什么是单倍体育种？原理是什么？常用什么方法？有什么优点？二突变体的利用。为什么组织培养中易产生突变？三、作物脱毒、人工种子、单倍体育种比较。⒈相同点：培育过程均有采用微型繁殖的技术。⒉区别：作物脱毒强调取材一定是无毒的；人工种子只需培育得到胚状体、不定芽、顶芽和腋芽；单倍体育种本质上属于有性生殖。细胞产物的工厂化生产。人们利用的细胞产物主要有哪些？2.2.1动物细胞培养和核移植技术 动物细胞工程常用技术手段有哪些？其中哪项工程是其他动物细胞工程技术的基础？一、动物细胞培养一概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。二过程：取材→分散→配制悬液→原代培养→传代培养。每一步分别是如何处理的？⒈细胞培养前为什么要对细胞分散处理？⒉什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？⒊什么是原代培养？什么是传代培养？⒋为什么用于核移植的细胞通常为10代以内的？10代以后的细胞的什么特点？三动物细胞培养需要满足以下条件(什么是内环境？内环境及稳态对细胞有什么作用？)⒈无菌、无毒的环境。培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。⒉营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。⒊温度和pH。适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。⒋气体环境。95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。四动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。五动物细胞培养与植物细胞(组织)培养比较比较项目 原理 培养基 结果 培养环境 培养目的植物组织培养 细胞全能性 固体；营养物质，激素 可培养成植株 离体 微型繁殖，作物脱毒等动物细胞培养 细胞增殖 液体；营养物质，动物血清等 培育成细胞群 体内或体外 获得细胞产物或细胞等二、动物体细胞核移植技术和克隆动物动物细胞培养为什么不能获得完整的动物个体？什么是动物核移植？什么叫克隆动物？一分类：胚胎细胞核移植(比较容易)；体细胞核移植(比较难)。二选用去核卵母细胞的原因：卵母细胞比较大，容易操作；卵母细胞细胞质多，营养丰富。三体细胞核移植的过程：取供体动物体细胞→供体细胞培养→供体细胞与去核卵母细胞融合→重组细胞→早期胚胎→移入受体动物子宫→克隆动物。⒈受体细胞为什么要选用卵母细胞？选用的是哪一时期的卵母细胞？怎样去除卵母细胞核？⒉怎样使供、受体细胞融合？怎样激活受体细胞？激活的目的是什么？四体细胞核移植技术的应用前景⒈加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；⒉保护濒危物种，增大存活数量；⒊生产珍贵的医用蛋白；⒋作为异种移植的供体；⒌用于组织器官的移植等。五体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体一、什么是动物细胞融合？二、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。三、动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。四、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目 原理 方法 诱导手段 主要用途植物体细胞杂交 细胞膜流动性、细胞全能性 去壁后诱导原生质体融合 物理、化学方法 克服远缘杂交不亲和的障碍，获得杂种植株动物细胞融合 细胞膜流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 理、化、生物法 制备单克隆抗体五、单克隆抗体：用单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体。一传统抗体生产方法及缺陷是什么？B淋巴细胞有什么特点？二单克隆抗体的制备过程⒈动物细胞融合⑴取材：骨髓瘤细胞和经抗原刺激的B淋巴细胞。(选用小鼠体内两种细胞是因为同一物种的细胞杂交易成功；这两种细胞各有什么特点？)⑵融合:诱导可用物理、化学、生物法等(会有几种融合方式？)；⑶用选择培养基筛选出杂交瘤细胞。(这类细胞有何特点？为什么？)⒉动物细胞培养⑴克隆化培养和抗体检测杂交瘤细胞，从中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞；⑵体内或体外大规模培养。(鼠单抗能否用于人体疾病的治疗？)三单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。四单克隆抗体的应用⒈作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。⒉用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗，可制成“生物导弹”(由哪几部分组成？各起什么作用？)，也有少量用于治疗其他疾病。专题3、胚胎工程什么是胚胎工程？主要包括哪些技术？3.1体内受精和早期胚胎发育一、精子和卵子的发生一精子的发生⒈场所：睾丸。⒉时期：从初情期开始，直到生殖机能衰退。⒊过程⑴精原细胞→多个精原细胞→初级精母细胞⑵初级精母细胞→次级精母细胞→精子细胞⑶精子细胞→精子(其中细胞核变为精子头部的主要部分；高尔基体发育为头部的顶体；中心体演变为精子的尾；线粒体形成线粒体鞘；其它物质浓缩为原生质滴)⒋⑴精子细胞变成精子过程中，主要发生了哪些变化？细胞核和线粒体为什么都保留了？线粒体为什么集中在尾的基部？⑵成熟精子：形似蝌蚪，由头、颈、尾三部分组成。精子大小与动物体型大小有关吗？二卵子的发生⒈场所：卵巢。⒉时期：胚胎在性别分化以后。⒊过程：卵原细胞→多个卵原细胞→初级卵母细胞胞→次级卵母细胞→卵细胞两次减数分裂分别是在何时、何地完成的？⒋卵泡主要由卵母细胞和卵泡细胞组成的，生长中的卵泡的卵母细胞与周围卵泡细胞突入卵泡腔形成卵丘。排卵：卵母细胞与周围透明带(由糖蛋白组成)、放射冠(透明带外的一层卵泡细胞)从卵泡中排出的过程。排卵后卵泡位置形成黄体。刚排出的卵是成熟的卵子吗？它在母体的什么部位与精子受精？三精子与卵细胞比较⒈相似点：最初阶段均进行有丝分裂，不断增加生殖原细胞的数量；经过两次减数分裂才能形成精子和卵子。⒉不同点：一个精原细胞→四个精子；一个卵原细胞→一个卵子；精子形状为蝌蚪状；卵子为球形；精子的形成从初情期开始，而多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的。二、受精⒈概念:指精子和卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。⒉标志:在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时。⒊场所:输卵管。⒋过程⑴受精前的准备阶段准备阶段1－精子获能：即精子必须在雌性动物生殖道内发生相应生理变化后，才能获得受精能力的现象。准备阶段2－卵子的准备：即卵子在输卵管内达到减数第二分裂中期时，才具备受精能力。⑵受精阶段：精、卵相遇→顶体反应(→顶体酶释放→溶解卵丘细胞(放射冠)→穿越放射冠→接触透明带→顶体酶溶解透明带→穿越透明带)→接触卵黄膜→产生透明带反应→形成第一道屏障→精子被微绒毛抱合→精子外膜与卵黄膜融合→精子进入卵→产生卵黄膜封闭作用→形成第二道屏障→形成雄原核→形成雌原核→雌雄原核发育、移动、接触、合并→形成受精卵。①受精阶段主要包括哪些环节？②什么是顶体反应？什么是透明带反应？什么是卵黄膜封闭作用？它们分别起什么作用？③什么是雌、雄原核？分别是什么时期形成的？四意义：维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定 ；对于生物的遗传和变异十分重要。三、胚胎发育：指受精卵发育成幼体的过程。受精卵最初发育在输卵管进行有丝分裂。一卵裂期。特点：在透明带内进行有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有减少。二桑椹胚。特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。三囊胚。特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。外为滋养层细胞，将发育成胎膜和胎盘；聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。什么叫孵化？四原肠胚。特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。3.2体外受精和早期胚胎培养一、体外受精一卵母细胞的采集和培养主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。二精子的采集和获能⒈收集的方法:假阴道法,手握法和电刺激等。⒉获能处理: 在体外受精前，要对精子进行获能处理⑴培养法：将取自附睾的精子，放入人工配制的获能液中，培养一段时间精子就可获能。如啮齿动物、家兔和猪。⑵化学法：将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能。如牛、羊。三受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。二、胚胎的早期培养胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。3.3胚胎工程的应用及前景一、胚胎移植。一什么叫胚胎移植？什么是“供体”？什么是“受体”？（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。）二地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。三胚胎移植的现状和意义⒈加速育种工作和品种改良；⒉大量节省购买种畜的费用；⒊一胎多产；⒋保存品种资源和濒危物种；⒌可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量。四生理学基础：⒈动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。⒉早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。⒊受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。⒋供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。五基本程序主要包括⒈对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。⑴对供体、受体进行选择①供体：遗传性能和生产性能优秀的个体；②受体：健康和正常繁殖能力的个体。⑵处理：同期发情。具体做法：注射相关激素。⒉采集卵母细胞。方法：注射促性腺激素使供体超数排卵。⒊配种或人工授精。精子来源：同种优良的雄性动物。⒋对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入－196℃的液氮中保存。⒌对胚胎进行移植。⑴手术法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入子宫角，缝合创口。⑵非手术法：将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位，注入胚胎。⒍移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。二、胚胎分割一概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。二意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。三理论基础：动物胚胎细胞的全能性。所以胚胎分割的时期为发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。四操作过程：用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。使用的主要仪器是实体显微镜和显微操作仪。操作注意事项：⒈对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。原因是内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。⒉胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低。五胚胎分割技术的缺陷⒈刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；⒉采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。三、胚胎干细胞一什么是哺乳动物的胚胎干细胞？二特点⒈形态：体积小，细胞核大，核仁明显；⒉功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞；⒊在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。三主要用途⒈可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；⒉是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；⒊可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；⒋利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；⒌随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。专题4、生物技术的安全性和伦理问题4.1转基因生物的安全性一、基因生物与食物安全反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变。正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据。二、转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响。反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”。正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限。三、转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响。反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体。正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境。4.2关注生物技术的伦理问题一、克隆人：两种不同观点，多数人持否定态度。否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆。四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。二、试管婴儿：两种目的试管婴儿的区别两种。不同观点，多数人持认可态度。否定的理由：把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重；早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”。肯定的理由：解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者最好、最快捷的方法，提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。三、基因身份证否定的理由：个人基因资讯的泄漏造成基因歧视，势必造成遗传学失业大军、造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果。肯定的理由：通过基因检测可以及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命目的。4.3禁止生物武器一、生物武器：生物战剂及施放它的武器、器材总称生物武器。生物战剂是指在战争中使人、畜致病，毁伤农作物的微生物及其毒素。二、种类：致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。三、散布方式：吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等。四、特点：致病力强、多数具传染性、传染途径多、污染面广、有潜伏期、不易被发现、危害时间长等。五、禁止生物武器公约及中国政府的态度。专题5、生态工程概念：生态工程是指人类应用生态学和系统学的基本原理和方法，通过系统设计、调控和技术组装，对已被破坏的生态环境进行修复、重建，对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善、并提高生态系统的生产力，从而促进人类社会和自然环境的和谐发展。5.1生态工程的基本原理什么是生态经济？怎样才能实现生态经济(循环经济)？生态工程所遵循的基本原理一、物质循环再生原理。理论基础：物质循环。实例：“无废弃物农业”。二、物种多样性原理。理论基础：生态系统稳定性。特点：物种越丰富，生态系统的抵抗力稳定性越高。三、协调与平衡原理。理论基础：生物与环境的协调与平衡。四、整体性原理。理论基础：社会-经济-自然复合成的巨大系统。五、系统学和工程学原理。一系统的结构决定功能原理。理论基础：分布式优于集中式和环式。二系统整体性原理。理论基础：整体功能大于部分之和。5.2生态工程的实例和发展前景一、生态工程的实例一农村综合发展型生态工程。问题：农村中物质、能量的多级利用问题。对策：进行综合发展型生态工程。二小流域综合治理生态工程。问题：小流域水土流失问题。对策：进行综合治理。三大区域生态系统恢复工程。问题：我国土地荒漠化问题。对策：植树造林、退耕还林、还草等。四湿地生态恢复工程。问题：湿地的缩小和破坏问题。对策：控制污染、退田还湖等。五矿区废弃地的生态恢复工程。问题：矿区生态环境的破坏问题。对策：修复土地、恢复植被等。六城市环境生态工程。问题：城市生态系统面临的垃圾、大气、噪音等污染问题。对策：城市绿化、污水净化和废弃物处理等综合治理。生态工程也有局限性，只有预防生态破坏，发挥生态系统的自然修复能力才是根本的出路。二、生态工程发展的前景一“生物圈2号”的实验及启示是什么？二我国生态工程发展前景的分析与展望⒈西方国家生态工程的特点是什么？⒉我国生态工程存在的问题及发展前景有哪些？
生物选修3复习必胜测试1、 限制酶作用特点是 2、 因工程的步骤主要有 ， ， ， ，3、mRNA通过 而获得的cDNA文库。用cDNA文库中分离出的目的基因构建表达载体时，必须加上 ，否则不能在受体细胞中表达。4、当双子叶植物或裸子植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的 化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌的 质粒的 片段会移到受体细胞，并整合到受体细胞的 上。因此，转基因植物常用农杆菌的质粒做为运载体，迄今为止，80%的转基因植物都是用这种方法获得的。5、检测目的基因是否插入染色体DNA上，采用 技术，此方法需要用 标记目的基因，以此做为 ，与基因驵DNA杂交。检测的基因是否转录出了mRNA，采用 技术。检测的基因是否翻译出了蛋白质，采用 技术。从人体内提取某种细胞，进行培养，在体外进行转基因，然后再重新输入患者体内，这叫 基因治疗。6、乳腺生物反应器是将药用蛋白基因与乳腺蛋白质的 重组在一起，然后导入 性哺乳动物的 ，然后送入母体内发育成个体，转基因动物达到泌乳期，可以从动物的乳汁中提取药物。原理相同的还有膀胱生物反应器。7、基因工程只能生产自然界 蛋白质，而蛋白质工程则可以通过对 的修饰或改造，对现有的蛋白质进行改造，或生产一种 的蛋白质。蛋白质工程的基本途径是 。蛋白质工程具有诱人的前景，但是最大的困难是：日前科学家对大多数蛋白质的 了解还不够。1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题：（1）催化①过程的酶是___________（2分）；核酸酶的作用是___________（2分）。（2）③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90~95℃时才能完成，说明DNA分子具有__________（2分）性。（3）由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是______________（2分），两者在作用特性上的区别是______ _____。（3分）（4）如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶______个（2分）。（5）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（ ）（2分）A．白细胞DNA B．病毒蛋白质 C．血浆抗体 D．病毒核酸（1）反转录酶（或逆转录酶） 解旋（2）稳定（3）DNA聚合酶 催化⑤过程的酶耐高温 （4）60 （4） D
生物选修3知识点 专题1 基因工程基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是 质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_ 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。 将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为 感受态细胞 ，再将 重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达 1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。 3.最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原－抗体杂交。 4.有时还需进行 个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 （三）基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。（四）蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）转录 翻译 专题2 细胞工程（一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→试管苗 ―→植物体 （2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 （3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术（1）过程：（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。（二）动物细胞工程 1. 动物细胞培养 （1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 （2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 （3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（4）动物细胞培养需要满足以下条件 ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。 ④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 （5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 （1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。（3）体细胞核移植的大致过程是：（右图）核移植胚胎移植（4）体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育； ②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白； ④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。3.动物细胞融合 （1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 （2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。 （3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导 克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导 制备单克隆抗体的技术之一4.单克隆抗体（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。（2）单克隆抗体的制备过程：（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。（4）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。（5）单克隆抗体的作用： ① 作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。 ② 用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。专题3 胚胎工程（一）动物胚胎发育的基本过程 1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。2、动物胚胎发育的基本过程（1）受精场所是母体的输卵管上段。 （2）卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。 （3）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。 （4）囊 胚：特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。（5）原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。（二）胚胎干细胞 1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。 2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。3、胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律； ②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等； ④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能； ⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 （三）胚胎工程的应用1.体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养： 主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。(2) 精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。 (3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 (4)胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。）地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。 (2) 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。(3) 生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。(4) 基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入－196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。3.胚胎分割 (1)概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。(2)意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。 (3)材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。） (4)操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 专题4 生物技术的安全性和伦理问题（一）转基因生物的安全性争论 ：(1)基因生物与食物安全： 反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据(2)转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响 反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限(3)转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响 反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境（二）生物技术的伦理问题(1)克隆人：两种不同观点，多数人持否定态度。 否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。 肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。 中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆。四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。(2)试管婴儿：两种目的试管婴儿的区别两种。不同观点，多数人持认可态度。 否定的理由：把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重；早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”。 肯定的理由：解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者最好、最快捷的方法，提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。(3)基因身份证： 否定的理由：个人基因资讯的泄漏造成基因歧视，势必造成遗传学失业大军、造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果。 肯定的理由：通过基因检测可以及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。（三）生物武器 (1)种类：致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。 (2)散布方式：吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等。 (3)特点：致病力强、多数具传染性、传染途径多、污染面广、有潜伏期、不易被发现、危害时间长等。 (4)禁止生物武器公约及中国政府的态度 本回答被提问者采纳
基因的操作工具 针线：DNA连接酶：扶手（磷酸二脂键）不是踏板（氢键） 条件①复制保存②多切点③标记基因 种类：质粒、病毒 运输工具：运载体 ①染色体外小型环状DNA ②存在于细菌、酵母菌 质粒特点 ③质粒是常用的运载体 ④最常用：大肠杆菌 ⑤对宿主细胞的生存无基因工程 (基因拼接技术、DNA重组技术、转基因技术) 决定性作用 直接分离 常用鸟枪法 提取目的基因 人工合成（反转录法、根据已知AA序列合成DNA） 目的基因与运载体结合 同一种限制酶 110、基因操作步骤 将目的基因导入受体细胞→细菌、酵母菌、动植物 CaCl2处理细胞壁 （ 受精卵好 繁殖速度快） 目的基因的检测和表达：标记基因、目的基因是否表达？ 逆转录 碱基互补配对 mRNA 单链DNA 双链DNA 推测 推测 合成 氨基酸序列 mRNA序列 DNA碱基序列 目的基因 药（胰岛素、干扰素、白细胞介素、乙肝疫苗）111、基因工程的成果 治病：基因诊断与基因治疗（基因替换） 新品种（转基因） 食品工业（食物） 环境监测（DNA分子杂交 探针） 生物固氮、基因诊断、基因治疗、单细胞蛋白（微生物菌体本身）、单克隆抗体、生物导弹（单抗+抗癌药物）112、 间接联系 核心 核膜 高尔基体 内质网 细胞膜 线粒体膜 间接（具膜小泡） （内吞外排说明双向） 分泌蛋白：抗体、蛋白质类激素、胞外酶（消化酶）等分泌到细胞外粗面内质网上的核糖体 内质网运输加工 高尔基体加工 成熟蛋白质 胞外113、生物膜系统（不等于生物膜）：细胞膜、核膜及由膜围绕而成的细胞器 离体→营养物质+激素 适宜温度+无菌 植物组织培养 离体→愈伤组织→根芽（胚状体）→植物体 选无病毒 尖（生长点） 紫草素114、植物细胞工程 两种不同→杂种细胞→新植物体 植物体细胞 去掉细胞壁→原生质体→杂种细胞→新植物体 杂交 种间存在生殖隔离 不能有性杂交 好处：克服远源杂交不亲和障碍 培育新品种 是其它动物细胞工程技术的基础 动物细胞培养 液体培养基：动物血清115、 动 取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 物 用胰蛋白酶处理 细 原代培养→传代培养（细胞株→细胞系 遗传物质发生改变） 胞 灭活的病毒做诱导剂+物理、化学方法工 动物细胞融合 最重要用途：制备单克隆抗体程 理论基础：细胞膜的流动性单克隆抗体→指单个B淋巴细胞经克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体（优点：特异性强、灵敏度高）。每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体（共百万种） *杂交瘤细胞 *生物导弹116、微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 质粒（小型环状DNA）控制抗药性、固氮、抗生素生成 核区（大型环状DNA）控制主要遗传性状 有的细菌有荚膜、芽孢、鞭毛 碳源：无机/有机碳源 自养/异养117、 微生物生长 氮源：加不加额外的氮源 所需的营养物质 生长因子：（维生素、氨基酸、碱基→构成酶和核酸） 水： 无机盐： 固体培养基：分离、鉴定、计数 物理性质 半固体培养基：运动、保藏菌种 液体培养基：工业生产118、培养基 天然培养基：工业生产 化学性质 合成培养基：分类鉴定 选择培养基 青霉素→选出酵母菌、霉菌等真菌用途 NaCl：金黄色葡萄球菌 鉴定培养基：伊红美蓝→大肠杆菌→深紫色和金属光泽自己设计实验：把混合在一起的圆褐固氮菌、硝化细菌、大肠杆菌区分开，并筛选纯种。酶合成的调节 诱导酶：基因和诱导物控制119、微生物代谢调节 酶活性的调节 结构改变 可逆 快速 准确 必需物质，一直产生 氨基酸、核苷酸、维生素 初级代谢产物 无种的特异性 多糖、脂类 120、代谢产物 非必需物质，一定阶段 抗生素、毒素 次级代谢产物 有种的特异性 四素 色素、激素 121、微生物群体生长曲线： 32 4 1 （1）调整期：代谢活跃，开始合成诱导酶 初级代谢产物收获的最佳时期（2）对数期：形态和生理特性稳定，代谢旺盛；科研用菌种，接种最佳时期（3）稳定期：次级代谢产物收获最佳时期，芽孢生成（种内斗争最剧烈） 及时补充营养物质，可以延长稳定期（4）衰亡期：多种形态，出现畸形，释放次级代谢产物 生存环境恶劣 与无机环境斗争最激烈的是4衰亡期。 营养物质消耗有害代谢产物积累PH不适宜导致3.4时期的出现。注意：前三个时期类似“S”型增长曲线，但是多了衰亡期122、影响微生物生活的环境因素 PH值：影响酶的活性、细胞膜的稳定性，从而影响微生物对营养物质的吸收温度：影响酶和蛋白质的活性O2浓度：产甲烷杆菌123、高压蒸汽灭菌法：1/5、1/2、2/3、75% 由里向外、细密、不重复 溶化后分装前必须要 调节pH 细菌培养的过程：培养基的配制→灭菌→搁置斜面→接种→培养观察 实例：谷氨酸发酵（黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌） 概念： 菌种选育：诱变育种、基因工程、细胞工程 培养基的配制：成分、比例，pH适宜 124、发酵工程 内容 灭菌：去除杂菌 扩大培养和接种：菌种多次培养达到一定数量 发酵过程：（中心阶段）控制各种条件，生产发酵产品 分离提纯 菌体：过滤、沉淀（单细胞蛋白即微生物菌体本身） 代谢产物：蒸馏、萃取、离子交换 应用 医药工业：生产药品和基因工程药品 食品工业：传统发酵产品、食品添加剂、单细胞蛋白等125、 C/N=4/1 菌体大量繁殖但产生的谷氨酸少(P79) 记住 C/N=3/1 菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增 溶氧不足： 产生乳酸或琥珀酸 pH呈酸性： 产生乙酰谷氨酰胺（P95）（55555高中老师看到得多感动啊，我现在还记着呢）
我有这个是八页的word文档告诉我邮箱 我发给你
你在这里找也没用，还是去找你老师吧，或者买本书，我这有电子稿，也发不了，哈哈